Гематологическое исследование крови на анализаторе: насколько согласован автоматический CBC с DIFF

Гематологическое исследование крови на анализаторе для рутинного CBC с DIFF обычно даёт воспроизводимые цифры. Сложнее оценить, насколько CBC и DIFF согласованы с референсной платформой и где появляется систематический сдвиг. В оценке серии Dymind авторы сообщили высокую between-run прецизионность по всем параметрам CBC и WBC-дифференциала и сильную корреляцию с Sysmex XN-3000 (r = 0,80–0,99) для большинства показателей. Пример 3-diff решения для небольших лабораторий — MicroCC-20 Plus. Дальше — принцип подсчёта, сравнение методов и контроль в КДЛ при анализе крови на гематологических анализаторах.

Что показала оценка автоматического CBC на гематологическом анализаторе

Between-run прецизионность CBC и DIFF была высокой; корреляция с Sysmex XN-3000 — r = 0,80–0,99 для большинства CBC-параметров. Сильная корреляция не означает полную взаимозаменяемость платформ: в той же работе отмечены систематические bias, в том числе по тромбоцитам.

Автоматический общий анализ крови на гематологическом анализаторе стабилен между прогонами. При смене платформы или интерпретации «пограничных» проб смотрят не только на r, но и на характер расхождений по отдельным параметрам. Dymind и Sysmex здесь — пары из исследования, не товары АССА.

Гематологическое исследование крови на анализаторе: импеданс и DIFF

Электронный подсчёт форменных элементов строится на принципе Coulter: при прохождении клетки через отверстие импеданс меняется пропорционально её объёму. Частица в электрическом поле даёт импульс — по амплитуде судят об объёме. Так устроен электронный подсчёт клеток крови, базовый принцип гематологических анализаторов.

Подсчёт RBC, WBC и тромбоцитов

На оценённых автоматах серии Dymind подсчёт RBC, WBC и тромбоцитов вели методом электрического импеданса. Гемоглобин (HGB) измеряли цианид-свободным колориметрическим методом. В этой серии импеданс считает клетки, колориметрия — HGB. Объёмные импульсы дают счётчики форменных элементов, концентрацию гемоглобина снимает отдельный фотометрический канал.

Логика 3-part DIFF

Дифференциальный подсчёт лейкоцитов исторически строится как произведение общего числа WBC и доли каждого типа клеток:

N_типа = WBC × f_типа

где f_типа — доля лейкоцитов данного типа. В ручном CBC доли получали после окраски, различающей типы; на автомате долю оценивает канал дифференциала.

У Dymind дифференциал лейкоцитов выполняли лазерной проточной цитометрией (DF55/DH76) или лазерным рассеянием с флуоресценцией (DH615).

Согласованность CBC и DIFF: корреляция Dymind и Sysmex XN-3000

Для RBC, HGB, HCT и числа тромбоцитов корреляция с Sysmex превышала 0,90; у MCHC и basophil counts согласованность была слабее.

Условия эксперимента S8

Сравнивали CBC и WBC-дифференциал анализаторов серии Dymind с Sysmex XN-3000 в одном клиническом центре. Between-run прецизионность оценивали по протоколу QC, соответствующему CLSI EP5. Подсчёт RBC, WBC и PLT — электрический импеданс; HGB — цианид-свободный колориметрический метод; дифференциал — лазерная проточная цитометрия (или лазерное рассеяние с флуоресценцией у DH615).

Параметры S8: импеданс RBC/WBC/PLT; колориметрический HGB без цианида; лазерный DIFF; референс — Sysmex XN-3000; between-run QC по схеме, соответствующей CLSI EP5. Sysmex здесь только референс исследования.

Сравнение методов дало сильную корреляцию (r = 0,80–0,99) для большинства параметров CBC, кроме MCHC и basophil counts. По RBC, HGB, HCT и PLT авторы указали r > 0,90; для MCHC коэффициенты были ниже: 0,707 (DF55) и 0,770 (DH76). Слабая согласованность MCHC известна и для других пар анализаторов — авторы ссылаются на похожие расхождения в литературе.

Параметр CBC / DIFFКорреляция r (Dymind vs Sysmex)Комментарий для лабораторииИсточник
RBC, HGB, HCT, PLTr > 0,90Сильная согласованность основных эритроцитарных показателей и тромбоцитовS8 / C6
Большинство параметров CBCr = 0,80–0,99Общий диапазон method comparison после фильтрации выборкиS8 / C5
MCHC0,707 (DF55) / 0,770 (DH76)Слабее остальных CBC-параметровS8 / C6
Basophil countsВне диапазона 0,80–0,99Исключение из общего правила согласованностиS8 / C5
PLT (систематический bias)Корреляция высокая, bias отрицательныйИмпеданс vs оптика Sysmex; осторожность при тромбоцитопенииS8 / C7

Отрицательный bias по тромбоцитам авторы связывают с различием принципов детекции: импеданс у Dymind против оптики Sysmex XN-3000. Большинство bias авторы считают клинически приемлемыми для рутины, но при тромбоцитопении результаты требуют осторожной интерпретации.

Что контролировать при автоматическом общем анализе крови

Практический минимум для КДЛ:

  • отдельно смотреть PLT при тромбоцитопении — импедансный и оптический подсчёт могут расходиться систематически;
  • не игнорировать флаги и abnormal scattergrams: такие пробы часто исключают из «красивых» сравнений методов;
  • при смене платформы проводить локальную валидацию по критичным параметрам (в т.ч. MCHC, DIFF, PLT), а не опираться только на чужой r из публикации;
  • помнить, что методы гематологических анализаторов (импеданс, оптика, лазерный DIFF) задают характер возможных bias.

Смежные общеклинические исследования в той же лаборатории часто идут на автоматическом биохимическом анализаторе. Для CBC/DIFF решают гематологический канал и правила эскалации флагированных проб. Рядом с биохимией в линейке АССА смотрят и гематологию: MicroCC-20 Plus — смежный контур ОАК, не замена биохимии. Автоматический общий анализ крови экономит время оператора, если заранее договорено, какие флаги уходят в ручной просмотр.

Границы применимости метода

Выводы о согласованности CBC/DIFF в S8 относятся к выборке без abnormal scattergrams — как раз к случаям, которые сложнее всего в рутинной практике.

Из method comparison исключали пробы с abnormal scattergrams — оценка согласованности ограничена для атипичных и флагированных случаев. Цифры r и bias из S8 нельзя переносить на MicroCC-20 Plus или произвольные модели. При тромбоцитопении PLT-bias импеданс vs оптика требует осторожной интерпретации. Принцип измерения конкретного 3-diff прибора АССА на карточке не указан — импеданс/оптику для него не приписываем.

Вывод и подбор 3-diff анализатора

Автоматический общий анализ крови на гематологическом анализаторе воспроизводим для рутины, но согласованность параметров и интерпретация bias зависят от принципа детекции и качества пробы. Для небольших лабораторий с потоком 40–100 проб в день типичный инструмент задачи — гематологический анализатор 3 diff с CBC и гистограммами.

Пример такого решения — автоматический гематологический анализатор MicroCC-20 Plus: 3-diff CBC (WBC, LYM/MID/GRA, RBC, HGB, HCT, PLT и др.), гистограммы WBC, RBC, PLT; объём пробы 9,8 мкл цельной крови; производительность 60 анализов/ч; настольный формат. Это иллюстрация класса приборов под рутинный ОАК, а не перенос цифр корреляции из S8 на эту модель.

Нужен 3-diff анализатор под ваш поток проб?

Если нужно подобрать конфигурацию под автоматический ОАК или уточнить, какой гематологический анализатор 3 diff подойдёт под ваш поток — посмотрите MicroCC-20 Plus и задайте вопрос: Александра, технический специалист по подбору лабораторного оборудования, поможет с подбором.

  1. Performance evaluation of the new Dymind automated hematology analyzer. Europe PMC Full Text XML: https://www.ebi.ac.uk/europepmc/webservices/rest/PMC12514533/fullTextXML
  2. The evolution of the complete blood count: have we gone too far? Europe PMC Full Text XML: https://www.ebi.ac.uk/europepmc/webservices/rest/PMC13040180/fullTextXML
  • Гематологическое исследование крови на анализаторе: насколько согласован автоматический CBC с DIFF