Система трансфекции Neon™ обеспечивает быструю и эффективную доставку нуклеиновых кислот во все типы клеток млекопитающих, включая первичные, стволовые и труднотрансфицируемые клетки (DTTC).
Преимущества:
- Эффективность трансфекции большинства линий клеток выше 70%;
- От 2x104 до 6x106 клеток в образце;
- Один набор реагентов для всех типов клеток;
- Открытые параметры электропорации;
- Возможность использования как оптимизированных (опубликованных), так и пользовательских протоколов;
- Простой трёхшаговый протокол.
Принцип работы:
Основная причина низкой выживаемости клеток при электропорации – интенсивный электролиз в трансфекционной камере, который ведет к перепадам pH и выбросу токсичных ионов металлов и хлора. В 2007 году была разработана и протестирована трансфекционная камера Neon™, представляющая собой тонкий капилляр с маленькой поверхностью электродов. Камера такой конфигурации обладает электрическим сопротивлением, в 200 раз большим, чем традиционная кювета, что минимизирует электролиз и значительно повышает выживаемость клеток. Кроме того, образующееся в капилляре однородное электрическое поле без краевых эффектов формирует в клетках одинаковые по размеру поры, благодаря чему достигается максимальная эффективность трансфекции.
Трехшаговый протокол электропорации:
Капилляр Neon™ является одновременно трансфекционной камерой и наконечником пипетки Neon™, что сокращает протокол электропорации до 3 простых действий:
- Надеть капилляр на пипетку и отобрать образец;
- Вставить пипетку с капилляром в штатив электропоратора, выбрать протокол и нажать «старт»;
- Снять пипетку и слить образец в подготовленную среду.
Отсутствие переливаний образца в кювету и обратно – дополнительная защита от контаминации.
| Область применения | трансфекция клеток млекопитающих |
| Трансфекционная камера | наконечник (капилляр) Neon™ |
| Типы клеток | стволовые клетки, первичные клетки, труднотрансфицируемые и стабильные линии |
| Напряжение в капилляре, кВ | 0,5—2,5 |
| Объём образца, мкл | 10 или 100 |
| Вносимый в клетки материал | ДНК, интерферирующая РНК |
| Количество клеток в образце | 2•10Λ4—6•10Λ6 |
| Время реакции, сек. | 1 |
| Питание | 100—240 В, 50—60 Гц, до 300 Вт |
| Габариты, мм | 234 × 300 × 220 |
| Вес, кг | 6 |